小鼠microRNA 130a/b的转录调控和功能研究

【摘要】MicroRNA(miRNA)是真核生物中位于非编码区的一类小RNA,他们在各种疾病和生理过程中起着非常重要的作用。其中miR-130a/b对白血病、脂肪生成等重要生理过程具有调控作用。然而,miR-130a/b的转录调控以及其在代谢和炎症方面的功能目前还远未研究清楚。本实验采用细胞转染、双荧光素酶报告系统、基因定点突变、染色质免疫共沉淀(ChIP)、荧光定量PCR、小鼠腹腔注射等实验技术,对miR-130a/b的转录调控机制进行了研究。我们发现C/EBPa可直接作用于miR-130a/b的启动子来调节其转录活性。取得的主要结果如下：1、克隆了小鼠miR-130a/b的启动子序列,并将它们构建于PGL3-Basic载体中。在BHK21细胞系中验证其启动子活性；2、通过荧光活性分析证实了C/EBPa对miR-130a的启动子活性具有显著的抑制作用,而对于miR-130b的启动子活性有显著性的上调；3、突变和ChIP实验确定了C/EBPa对miR-130a/b的关键作用位点和二者的直接相互结合；4、功能研究上,验证了miR-130a/b对3T3-L1细胞在成脂分化雌中的表达量显著下降,在稳转细胞中证实了miR-130a/b对TNFa和SP1的抑制作用。在活体研究中发现LPS处理导致niR-130a/b在腹腔巨噬细胞中的表达水平下降,并使附睾脂肪组织中miR-130b显著性上调。总之,本文证实了C/EBPa对miR-130a启动子活性的抑制作用和对miR-130b启动子活性的上调作用,并在细胞和活体水平上证明了miR-130a/b是参与代谢和炎症反应的重要因子。
【作者】董向坤；
【导师】陈小冬；
【作者基本信息】华中农业大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】miR-130a/b；C/EBPα；启动子；炎症反应；脂肪代谢；

【参考文献】
[1]安长亮.某型红外指挥观测仪改进设计[D].西安工业大学,光学工程,2012,硕士.
[2]王燕.蜂窝钢柱绕强轴的稳定性能分析[D].西安建筑科技大学,结构工程,2013,硕士.
[3]范欣,范平,吴跃焕,李松栋,周激.聚苯胺在不同防腐应用体系中的应用研究进展[J].高分子通报,2015,02:32-39.
[4]蔡艳.我国安全社区的构建研究[D].山东大学,公共管理（专业学位）,2012,硕士.
[5]武洋.我国上市公司治理结构对会计信息披露质量影响的实证分析[D].内蒙古财经大学,会计学,2012,硕士.
[6]韩立新,恽爽,陈道蓄,谢立.一个面向Internet数据管理的系统模型[J].计算机科学,2002,01:109-112.
[7]熊伟.移动车辆荷载作用下自锚式悬索桥的动力响应分析[D].哈尔滨工业大学,交通运输工程,2013,硕士.
[8]游丽佳.EXIN和Feng’s MCA学习算法的收敛性分析[D].大连理工大学,计算数学,2013,硕士.
[9]张志毛.软第二相对Laves相MgCu_2基复合材料组织及性能的影响[D].兰州理工大学,材料加工工程,2013,硕士.
[10]葛冬琰.高校音乐教育专业学生钢琴学习能力的养成及对策研究[D].苏州大学,课程与教学论,2013,硕士.
[11]杨怡.脑功能开发与化学学习研究[D].苏州大学,2004.
[12]刘爱明.基于平行排列3×3耦合器的双环全光缓存器的研究[D].北京交通大学,2005.
[13]薄翠萍.轮台白杏开心形树形冠内光分布特征研究[D].新疆农业大学,森林经理学,2012,硕士.
[14]景译卫.新时期高校德育师生主体际关系的构建研究[D].吉林农业大学,思想政治教育,2012,硕士.
[15]张宇明.男性雄激素性脱发的临床资料分析及毛发镜在其早期诊断与疗效评估中的应用探索[D].北京中医药大学,中医学,2014,硕士.
[16]龚晓峰,高衿畅,周春晖.时滞系统PID控制器内模整定方法的扩展[J].控制与决策,1998,04:50-54.
[17]张袅.广州市对口帮扶地区扶贫开发研究[D].中南林业科技大学,农村与区域发展,2013,硕士.
[18]冯玉姣.关于临界图边数下界的研究[D].中国矿业大学,应用数学,2014,硕士.
[19]王孝海.聚3，4-乙撑二氧噻吩/壳聚糖导电多孔组织工程材料的制备及表征[D].山东大学,2012.
[20]谢华芳.中小外资代工企业生存状况及发展研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[21]范世超.电容性设备故障诊断系统的研究[D].吉林大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[22]刘欢锐.石墨烯/镍/聚环氧乙烷三元复合材料的制备与性能研究[D].西南科技大学,2014.
[23]缪永伟,林海斌,寿华好.基于Hermite插值的网格拼接和融合[J].中国图象图形学报,2013,12:1651-1659.
[24]胡璐璐.王雪涛以及他的小写意花鸟画研究[D].湖南师范大学,美术学,2013,硕士.
[25]庄凯丽.汉语教学类期刊论文立场标记语研究[D].北京外国语大学,语言学及应用语言学,2014,硕士.
[26]陈晶.英语写作测试中的评分者效应[D].上海外国语大学,英语语言文学,2012,硕士.
[27]许其峰.UHP灯光通量测量系统[D].浙江大学,光学工程,2004,硕士.
[28]李洪嘉.基于J2EE的电信营销渠道管理系统设计与实现[D].南昌大学,计算机技术（专业学位）,2012,硕士.
[29]孙兴峰.司法裁判与社会效果[D].苏州大学,法学理论,2014,硕士.
[30]韦婧婧.创业板上市公司IPO效应实证研究[D].首都经济贸易大学,企业管理,2013,硕士.
[31]郝健康,张明廉,文传源.混合坐标下的卡尔曼滤波及其应用[J].控制与决策,1997,02:126-131.
[32]原东鹏,曾明,柏春美,崔冬梅,张辰.IPrAuCl/AgOTf催化下合成N-磺酰基四氢吡咯类化合物[J].有机化学,2014,06:1231-1234.
[33]张建国.生源薄弱高中和谐班级的构建[D].华中师范大学,教育管理,2014,硕士.
[34]袁晓芳.基于情景分析与CBR的非常规突发事件应急决策关键技术研究[D].西安科技大学,2011.
[35]资坚.湖南湘邮科技股份有限公司软件市场营销战略研究[D].湖南大学,工商管理,2011,硕士.
[36]倪娜.整浇装配式预应力桥墩抗震性能有限元分析[D].武汉理工大学,结构工程,2013,硕士.
[37]杰迪安.中国与欧盟关系研究[D].浙江大学,中国学,2013,硕士.
[38]巩晶.延安卷烟厂制丝车间MES系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,软件工程,2011,硕士.
[39]白萍.总装备部直属单位成果管理信息系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程,2011,硕士.
[40]陈宇斌.钢管探伤缺陷高速标记系统设计[D].华中科技大学,机械工程,2013,硕士.
[41]费唯.IP城域网QoS部署的研究与设计[D].南京邮电大学,电子与通信工程（专业学位）,2012,硕士.
[42]邬亦菁.我国机动车物权变动中善意第三人的保护[D].上海交通大学,法律,2013,硕士.
[43]高斌.山区河流自然河湾与人工规则河湾冲刷特性[D].长安大学,防灾减灾工程及防护工程,2013,硕士.
[44]刘娜.拟除虫菊酯类农药降解基因estA的可溶性原核表达及3-苯氧基苯甲酸的降解初探[D].西南交通大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[45]孟毅芳.移动Agent系统的安全性问题及对策研究[D].首都经济贸易大学,信息经济,2004,硕士.
[46]王博.ICSID仲裁裁决执行中的国家豁免问题研究[D].郑州大学,国际法,2013,硕士.
[47]梁国华,张景峰,路鹏,马荣国.八车道高速公路作业控制区交通组织形式效果评价[J].中外公路,2014,04:347-352.
[48]杨媛.嗜酸乳杆菌肽聚糖的修饰及其对小鼠肠黏膜保护作用研究[D].宁波大学,食品工程（专业学位）,2014,硕士.
[49]向军.不同土地处置方式下的农民工进城落户意愿的影响因素分析[D].大连理工大学,行政管理,2013,硕士.
[50]徐向阳.600MW机组水厂远程监控系统的设计研究[D].华北电力大学（北京）,热能动力工程,2003,硕士.